Titre : | APPROCHE TRANSCRIPTOMIQUE DU BENEFICE FONCTIONNEL DES FOLATES ET ETUDE DE L'EFFET DE LA FUMONISINE B1 |
Auteurs : | AFIF ABDEL NOUR ; INSTITUT POLYTECHNIQUE LASALLE BEAUVAIS |
Type de document : | Thèse-Mémoire |
Editeur : | BEAUVAIS : INSTITUT POLYTECHNIQUE LASALLE BEAUVAIS, 2007 |
Format : | 133 P. |
Langues: | Français ; Anglais |
Concepts : |
BIOLOGIE MOLECULAIRE
APOPTOSE FOLATE FUMONISINE ACIDE FOLIQUE VITAMINE B FONCTION PHYSIOLOGIQUE |
Résumé : | Les folates (vitamine B9) apportés par les aliments sont indispensables à la croissance et la différenciation cellulaire du fait de leur implication dans la biosynthèse des acides nucléiques et dans le processus de méthylation de l'ADN. Les folates sont internalisés dans les cellules grâce au transporteur des folates réduits (hRFC) et au récepteur de folates (FR). Les aliments sont également des supports potentiels de contaminants naturels comme la fumonisine B1 (FB1), ce qui pose un problème de sécurité sanitaire et de santé publique. La FB1 est un contaminant des céréales qui agit sur la voie de synthèse des sphingolipides des cellules humaines en inhibant l'activité de la céramide synthase, altérant ainsi l'intégrité des protéines membranaires dont le FR. La présente thèse a porté sur l'étude de l'altération du bénéfice fonctionnel des folates par l'ingestion de la FB1. Nous avons évalué, à partir des cellules HepG2, l'effet de la FB1 sur l'expression des transporteurs des folates, sur l'importance des folates au cours du processus de toxicité induit par la FB1 ainsi que sur les mécanismes moléculaires de cette toxicité par approche transcriptomique. Des techniques de double clonage de gènes pour la PCR en temps réel et des techniques microfluidiques ont été développées pour mesurer l'expression (transciptionnelle et traductionnelle) des transporteurs. L'analyse transcriptomique de 29000 gènes des cellules en début d'apoptose induite par la FB1 a été faite pour étudier les mécanismes moléculaires mis en jeux. Les résultats ont montré que la FB1 induisait l'apoptose et que ce phénomène était fonction de la concentration de la FB1 et de la durée d'incubation avec les cellules. Dans un milieu normal, en présence d'acide folique le début de l'apoptose avec 1?M de FB1 est observé au bout de 72 h. L'apoptose induite par la FB1 est réduite de 10% lorsque le folate oxydé (acide folique) est remplacé par une des formes réduites des folates, le 5-methyl-té trahydrofolate (CH3-THF). Nous avons montré que la FB1 altérait l'expression traductionnelle du FR mais pas celle du hRFC. L'analyse des données transcriptomiques n'a pas révélé la génotoxicité de la FB1, néanmoins, le déficit en AF en présence de la FB1 a activé des gènes codant des enzymes impliquées dans le réseau de réparation de l'ADN. L'action bénéfique du CH3-THF pourrait s'expliquer par son incorporation directe dans le mécanisme métabolique de réparation de l'ADN en particulier pour la réparation des erreurs d'incorporation de l'uracile dans l'ADN. Pour confirmer ces résultats nous avons étudié la méthylation et la présence d'uracile dans l'ADN. Les résultats de cette thèse suggèrent que la FB1 couplée avec un déficit en acide folique auraient également une action génotoxique, outre la cytotoxicité. |
Exemplaires (1)
Cote | Support | Section | Disponibilité |
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RES 10206 | Texte imprimé | Réserve | Disponible |